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產(chǎn)品名稱：
C2C12 小鼠成肌細胞/鏡像綺點（iCell）
產(chǎn)品型號： C2C12產(chǎn)品時間： 2025-08-12描述：C2C12 小鼠成肌細胞/鏡像綺點（iCell）C2C12 小鼠成肌細胞介紹這是D. Yaffe 和 O. Saxel建立的小鼠成肌細胞株的亞克?。ㄓ蒆. Blau等人構建）。C2C12細胞株分化很快，形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2（BMP-2）處理，導致分化途徑從成肌細胞轉換成成骨細胞。檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒（鼠痘）陰性
產(chǎn)品介紹
這是D. Yaffe 和 O. Saxel建立的小鼠成肌細胞株的亞克隆(由H. Blau等人構建)。C2C12細胞株分化很快，形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)處理，導致分化途徑從成肌細胞轉換成成骨細胞。檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。
細胞特性
1） 來源：組織： 肌肉 品系：C3H 細胞類型： 成肌細胞
2） 形態(tài)：成肌細胞
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途：僅供科研使用。
細胞接受后的處理：
1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml新的*培養(yǎng)基。
4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。
5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們取得聯(lián)系。
細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二． C2C12 小鼠成肌細胞/鏡像綺點（iCell）處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。
3） 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
下面T25瓶為類；
1，細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入1ml*培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產(chǎn)品和服務介紹：
一、原代細胞服務：
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞系服務：
細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務：
iPS細胞基礎培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層）
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術外包服務、客戶定制服務等
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司
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